Диагностика протозойных болезней (прижизненные и посмертные методы, в т.ч. и дифференциальная). Диагностика пироплазмидозов животных (пироплазмоза, бабезиоза, тейлериоза). Диагностика эймериозов (кур, кроликов, крупного и мелкого рогатого скота), саркоцистозов и токсоплазмоза сельскохозяйственных животных

diagnostika-protozojnyx-boleznej-prizhiznennye-i-posmertnye-metody-v-t-ch-i-differencialnaya-diagnostika-piroplazmidozov-zhivotnyx-piroplazmoza-babezioza-tejlerioza-diagnostika-ejmeriozov_001Тип подцарства Protozoa, подтип  Apicomplexa; классы —  Sporozoa и  Piroplasmea; Piroplasmea делится на 2 отряда — Piroplasmida и Teileriida; семейства  Babesiidae  (род Babesia и др.) и   Teileriidae  (род Teileria).

Пироплизмиды, обитающие в эритроцитах, реже лейкоцитах и плазме крови. Это очень мелкие одноклеточные организмы, видимые только под микроскопом. Тело их состоит из ядра и протоплазмы. Форма их самая разнообразная: овальная, грушевидная (одиночная и парная) амёбовидная, кольцевидная. Величина их колеблется от 0,6 до 7 мкм. Количество паразитов в одном эритроците 1-2, реже 4-6. Расположение в эритроците может быть центральное или периферическое.

Пироплазмиды вызывают заболевания у крупного рогатого скота  — пироплазмоз, бабезиоз, франсаиеллёз, тейлериоз; у мелкого рогатого скота – бабезиоз и пироплазмоз; у лошадей пироплазмоз и нутталиоз; у свиней и собак – пироплазмоз.

Пироплазмозы. Возбудители:     Piroplasma bigeminum (крупный рогатый скот);     Piroplasma ovis (овцы); Piroplasma caballi (лошади); Piroplasma canis (собаки). Величина округлых пироплазм 1,5-3 мкм, грушевидных – 3,5-5 мкм. Угол расхождения острый, располагаются в центре эритроцита. При окраске по Романовскому ядро розово-рубинового цвета, цитоплазма – голубого. Процент зараженных эритроцитов -10-15.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: регистрируют пироплазм в южных районах. Переносчиками служат однохозяинные клещи Boophilus calcaratus и трёххозяинные клещи рода Hemaphysalis punctata; двуххозяинные — Rhipicephalus bursa rossicus, у крупного и мелкого рогатого скота,  Dermacentor pictus, Hyalomma plumbeum – у лошадей; Dermacentor и Rhipicephalus sanguineus – у собак. Заболевание начинается с мая-июня, иногда 2 и 3 вспышки. Пироплазмы передаются клещами трансовариально. Обнаружение клеща – переносчика на теле животного позволяет подозревать пироплазмоз (ксенодиагностика). Телята переболевают легче взрослых животных;

— симптомы болезни: инкубационный период — 10-15 дней; лихорадка постоянного типа, анемия,  желтушность   видимых слизистых оболочек, гемоглобинурия (на 2-3 – й день болезни), расстройство сердечной деятельности, (стучащий толчок, учащение пульса и дыхания), желудочно-кишечного тракта (атония, понос, запор). Снижение продуктивности (удои молока).

— лабораторные исследования тонкого мазка крови окрашенного по Романовскому. Обнаруживают круглые и овальные пироплазмы. Характерная форма считается парная, грушевидная, соединённая узкими концами под острым углом;

— патологоанатомические изменения: подкожная клетчатка желтушная, слизистые оболочки анемичны и желтушны. Сердце увеличено, дряблое, под эпи- и эндокардом точечные или обширные пятнистые и полосчатые кровоизлияния. Кровь водянистая. Печень увеличена, дряблая, серо-коричневого цвета. Селезёнка увеличена в 2-3 раза с округлёнными краями, на разрезе сочная, зернистая, пульпа её размягчена, но не стекает с поверхности разреза. В мочевом пузыре моча окрашена в красный цвет.

Бабезиозы крупного рогатого скота Babiesia bovis, округлой, овальной, грушевидной формы. Величина их меньше радиуса эритроцита,1,5-2,4 х 0,.7-1,1 мкм. Угол расхождения парных грушевидных форм тупой. Бабиезии в количестве 1-2 располагаются по периферии эритроцита. Процент заражённых эритроцитов – 8-12, иногда 40.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: заболевание регистрируют в центральной зоне, а также в Прибалтике, Беларуси, Украине. Наблюдается в мае, июне, июле, затем август и сентябрь. Переносчики возбудителя клещи Ixodes ricinus и       Ixodes persulcatus, обитающие во влажных, заросших кустарником пастбищах. Молодняк до года переносит легко. Тяжело болеют племенные и привозные животные. Усугубляют заболевание сопутствующие инфекции, инвазии (диктиокаулёз, лептоспироз);

— симптомы болезни – как при пироплазмозе;

— лабораторные исследования: микроскопия тонкого мазка крови по Романовскому. Бабиезии  располагаются по периферии эритроцита, под тупым углом;

— патологоанатомические изменения  такие же, что и при пироплазмозе. Селезёнка увеличена в 2-3 раза, тёмно-вишнёвого цвета, иногда её разрыв. Сердце гипертрофировано, сердечная мышца цвета варёного мяса.

Франсаиеллёз крупного рогатого скота – Fransaiella colchica, округлой грушевидной формы, величина их равна радиусу эритроцита (1,4-2, мкм), угол расхождения парных грушевидных форм – тупой. Расположение в эритроцитах центральное. Процент поражения эритроцитов редко превышает 5.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: распространёно на Северном Кавказе, Среднеазиатских республиках. Ареал распространения совпадает с пироплазмозом. Апрель-май, июль-август, до октября. Переносчики – клещи  Boophilus calcaratus. Тяжело болеют телята от 1 до 2-х лет. Падёж 3-17 % от числа больных. Животные старше 2-х лет болеют ещё тяжелее;

— микроскопия мазков: парные грушевидные  формы соединены под тупым углом и напоминают оправу очков. Размер их = радиусу эритроцита;

— патологоанатомические изменения сходны с таковыми при пироплазмозе.

Пироплазмозы овец и коз. Piroplasma ovis, переносчики — клещи  R.bursa. Овцы болеют тяжелее ягнят. Бабезиозы: —  B.ovis, % заражения 45.

Морфология, эпизоотология и другие методы диагностики такие же как и при  пироплазмозе и бабезиозе крупного рогатого скота.

Пироплазмоз лошадей —   Piroplasma caballi. Морфология аналогична с   Piroplasma bigeminum. Количество заражённых эритроцитов – 0,5-10 %. Клещ — переносчик  Hyalomma plumbeum.

— симптомы болезни: лихорадка, анемия, желтушность; метеоризм, лёгкие колики. Гемоглобинурия бывает редко. Моча тёмно-жёлтого цвета, мутная. Аборты.

— диагноз подтверждается микроскопией и изучением патологоанатомических изменений.

Нутталиоз лошадей —      Nuttalia equi, овальной, грушевидной, крестообразной  формы («мальтийского креста»). В эритроците их 1-4 экземпляра и расположены центрально. Количество заражённых эритроцитов от 5 до 30 %.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: нутталиоз встречается в тех же местах, где и пироплазмоз и может протекать одновременно ( с апреля по август). Переносчики клещи — рода    Dermacentor, на юге – Hyalomma,  R.bursa  и др.;

— симптомы болезни: инкубационный период 1-2 недели, острое и подострое течение болезни. Лихорадка ремитирующего типа. Анемия, желтушность, кровоизлияния. Пульс, дыхание учащены. Моча коричневая. Заболевание длится 30 и более дней;

— микроскопия: мальтийский крест;

— серологические исследования: РДСК со специфическим антигеном с целью выявления нутталионосителей;

— патологоанатомические изменения, как и при пироплазмозе.

Пироплазмоз собак – Piroplasma canis, величина 2,1-5,3мкм. В одном эритроците 1-16 пироплазм. Кроме того, их находят в лейкоцитах и в плазме крови. Заражённость эритроцитов достигает 6-10 %.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: распространённое очаговое. Переносчики клещи Dermacentor pictus, в южных районах    Rh.sanguineus. Тяжело болеют щенята;

— симптомы болезни: инкубационный период 6-20 дней, высокая температура тела, анемия, желтушность, конъюнктивит и ринит. Гемоглобинурия. Расстройство сердечно-сосудистой системы и желудочно-кишечного тракта;

— микроскопия: пироплазмы больше радиуса эритроцитов, расположены под острым углом;

— патологоанатомические изменения как при геморрагическом диатезе все органы и ткани.

Тейлериозы крупного рогатого скота —   Theileria annulata,  Theileria sergenti и др.

Морфология возбудителя: при попадании ( со слюной клещей ) в организм животных тейлерии размножаются в клетках РЭС (лимфатические узлы, печень, селезёнка, костный мозг) и образуют макрошизонты и  микрошизонты (гранатные тела, или коховские шары. Гранатные тела состоят из цитоплазмы, окрашиваются в голубой цвет и 10-50 (и более) ядер красно-рубинового цвета. Форма гранатных тел разнообразная, величина их 9-30 мкм.

Микрошизонты распадаются на такое количество микромерозоитов, сколько было ядер, после этого они проникают в эритроциты. Они разной формы. В эритроците располагается до 7 паразитов, преимущественно в центре. В разгар болезни заражённость эритроцитов достигает 80-95 %.

Методы диагностики:- эпизоотологические данные: очаги болезни Северный Кавказ, Средняя Азия. В Приморском крае; в тёплый период года Theileria sergenti. Переносчики: клещи Hyalomna anatolicum, Hyalomna detritum, которые могут жить в помещениях и базах для скота, чем и объясняется существование стационарных очагов тейлериоза. Телята, а также племенной и завезённый скот переболевают тяжело;

— симптомы болезни: инкубационный период 6-19 дней. Течение острое и подострое. Первый признак – одностороннее увеличение поверхностного лимфатического узла, чаще предлопаточного, подколенного, надвымянного. Повышается температура тела до 41-42оС, вначале гиперемия слизистых оболочек, а затем их анемия и слабая желтушность с массовыми кровоизлияниями, в том числе и коже. Гемоглобинурия отсутствует. Расстройство функций сердечно-сосудистой системы и желудочно-кишечного тракта. Продолжительность болезни 1-2 недели;

— лабораторные исследования: микроскопия мазков из пунктата увеличенных лимфатических узлов. Окрашивают по Романовскому, смотрят под иммерсией, находим гранатные тела. В период болезни в тонком мазке из капилляров ушной раковины находим мелкие округлые или другие формы паразитов;   Theileria sergenti больше по величине, запятовидной, палочковидной и округлых форм;

 — серологические исследования: РСК со специфическим антигеном. Раннюю диагностику проводят с антигеном из гранатных тел, а более позднюю – с антигеном из эритроцитарных форм;

— патологоанатомические изменения: труп истощён, анемичен. Кожа и слизистые оболочки желтушны. Лимфатические узлы, селезёнка увеличены. Слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта гиперемирована, в сычуге – изъязвления. Сердце дряблое, массовые кровоизлияния.

Эймериозы (кокцидиозы) сельскохозяйственных животных. У кур паразитирует более 10 видов и наиболее патогенными являются Eimeria tenella, necatrix и   Eimeria maxima. Это моноксенные возбудители.

Отряд   Coccidiidae объединяет много семейств, в том числе и  Eimeriidae, которое делится на подсемейства Eimeriinae  с одним родом Eimeria и подсемейством Isosporinae, включающее роды: Isospora,  Toxoplasma,  Sarcocystis,  Besnoitia и др.

Из организма хозяина выделяются незрелые ооцисты кокцидий, содержащие один споробласт, заключённый в толстую двухконтурную оболочку. Во внешней среде из споробласта формируются 4 споры, в каждой по 2 спорозоита (всего 8). На одном из полюсов ооцисты имеется микропиле. Кроме того имеются остаточные тела в ооцисте и в спорах. Учитывают сроки споруляции, патентный и препатентные периоды и другие особенности.

Методы диагностики эймериоза кур. – эпизоотологические данные: заболевание распространено повсеместно. Болеют цыплята 10-80 дневного возраста. Заражаются алиментарным путём, чаще в тёплое время года. При клеточном содержании  инвазированность их ниже, чем при напольном.;

— симптомы болезни: течение болезни острое, от нескольких дней до 2-3 недель. Теряют аппетит, жажда, худеют, расстройство функции желудочно-кишечного тракта, понос, помёт  жидкий,  тёмный, иногда с примесью крови. Гребешок и серёжки анемичны. Нарушена координация движения. Развиваются парезы, параличи конечностей. Летальность высокая;

— лабораторные исследования: а) микроскопия – исследуют помёт методом нативного мазка, методом Фюллеборна или Дарлинга и обнаруживают ооцист;

— патологоанатомические изменения: труп истощён, анемичен. При  Eimeria tenella  слепые кишки утолщены, слизистая оболочка геморрагически воспалена, местами некротизирована, в просвете сгустки крови. При паразитировании  Eimeria maxima,    Eimeria necatrix – изменения в тонком отделе кишечника. Содержимое творожистое, изъязвления, узелковые поражения. Со стороны серозы кишечника можно видеть беловатые очажки с булавочную головку – это места развития шизонтов. В соскобе со слизистой оболочки и в мазках из содержимого кишечника находят ооцисты, споры и другие стадии эндогенного развития.

Эймериоз кроликов – 9 и более видов.

Наиболее патогенными являются: Eimeria stiedae (печёночная), Eimeria perforans, Eimeria magna, Eimeria media, Eimeria intestinalis  и др. Морфологически они отличаются по форме, размеру, цвету, а также по месту локализации, препатентному и патентному периодам, срокам эндогенного развития (споруляции).

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: болезнь распространена повсеместно. Заражается молодняк с 1-2 –х недельного возраста, но болезнь проявляется после отъёма крольчат от матери. Смена режима кормления ухудшает болезненный процесс. Взрослые —  кокцидионосители  и являются источником распространения инвазии. Развитие ооцист во внешней среде происходит за 3-5 дней, поэтому быстрая реинвазия. Механические переносчики – мухи, грызуны, птица;

— симптомы болезни: инкубационный период  4-12 дней. У крольчат 1-1,5 мес. заболевание проявляется остро и подостро; с 1,5 мес. – подостро, а у 4-6 мес. – подостро и хронически, у взрослых – хронически. Различают печёночную, кишечную и смешанную формы. Вначале: потеря аппетита, угнетение, температура в норме, метеоризм кишечника, увеличивается объём живота. Больные лежат на животе. Понос, учащение мочевыделения, появляются нервные расстройства, судороги конечностей, животные худеют, слизистые оболочки анемичны. В крови резко снижается количество эритроцитов и гемоглобина;

— лабораторные исследования: копрологическим методом Дарлинга и обнаружение ооцист эймерий и их дифференциация;

— патологоанатомические изменения: труп истощён, анемичен. Характерные изменения в печени, она увеличена, на  поверхности и внутри находят серовато-белые или желтоватые узелки круглой или неправильной формы,  величиной от просяного зерна до горошины. Желчные протоки расширены, вокруг разрастание соединительной ткани. Слизистая оболочка разных участков кишечника может быть геморрагически и даже дифтеретически воспалена, множественные беловатые очажки – места скопления шизонтов.

Эймериоз крупного рогатого скота  более 10 видов. Наиболее патогенные – Eimeria bovis,  Eimeria ellipsoidalis.

Морфологические различия: Eimeria bovis – яйцевидная, розовая, 27 х 20 мкм, микропиле слабо заметно, остаточного тела нет, локализация – толстый кишечник.

Eimeria zuernii – круглая, бесцетная, 18 х 15 мкм, микропиле нет, остаточного тела нет, локализация – толстый кишечник.

 Eimeria ellipsoidalis – эллипсовидная, бесцветная, 21,9 х 16,5 мкм, микропиле слабо заметно, остаточное тело есть в спороцисте, локализация  — тонкий кишечник.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: регистрируют очагово повсеместно. Болеют телята с 1-6 мес. возраста, взрослые – кокцидионосители, источник инвазии. Сезонность – осень, весна. Факторы, способствующие распространению болезни: стойловое содержание, влажность в помещении, в рационе грубые, недоброкачественные корма и др.;

— симптомы болезни: инкубационный период 2-3 недели. Течение острое и хроническое. При остром течении у телят поднимается температура, наступает угнетение, фекалии жидкие, тёмного цвета, зловонные, позднее появляется слизь, кровь, плёнки фибрина, пузырьки газа. Гипотония преджелудков, усиленная перистальтика. Животные худеют, летальность 50 %. При хроническом течении те же признаки, но выражены слабее;

— микроскопические исследования: фекалий берут из прямой кишки и  исследуют методом Фюллебора или Дарлинга. В поле зрения микроскопа  40-50 и более ооцист – подтверждает диагноз;

— патологоанатомические изменения: труп истощён. Слизистая оболочка тонкого и толстого отделов  кишечника набухшие, гиперемированные с кровоизлияниями. Единичные или сплошь усеянные мелкоочаговые инфильтраты – скопления ооцист.

Эймериоз овец – 8 видов. Наиболее распространённые:  Eimeria arloingi,  Eimeria ninaekohljakimovae, Eimeria faurei — локализуется в тонком отделе кишечника, Eimeria intricata – в тонком и толстом отделах кишечника.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: распространено повсеместно  в тёплый и влажный период года. Заражение алиментарным путём с кормом, водой. Ягнята болеют с 2-3 мес. возраста, иногда с летальным исходом. Взрослые – паразитоносители. Заражение возможно с первых дней жизни. При слизывании ооцист с вымени матери, в шерсти.

— симптомы болезни: инкубационный период 11-20 дней. Течение болезни в зависимости от ИИ может быть острым, подострым и хроническим. Обычно болезнь начинается с непродолжительного подъёма температуры тела. Развивается анемия. Состояние угнетённое, аритмия сердца. Аппетит нарушен, жажда, фекалии жидкие (не обязательно), ооцисты, слизь, кровь. При тяжёлом течении – бурная перистальтика сменяется атонией и метеоризмом кишечника;

— микроскопическое исследование: свежие фекалии  исследуют методом Дарлинга и дифференцируют ооцист;

— патологоанатомические изменения зависят от течения болезни. При остром – катаральное воспаление тонкого отдела кишечника (энтерит), кровоизлияния и серо-белые узелки величиной с просяное зерно, в содержимом находятся эймерии разных стадий развития. Регионарные лимфатические узлы увеличены, воспалены. При подостром течении те же изменения в кишечнике, но выражены слабее. Животные худеют, анемия.

Токсоплазмоз животных.Toxoplasma gonclii, семейство  — Isosporae, подсемейство —  Isosporinae , класс —  Sporozoa, отряд —  Coccidiida.  Гетероксенный возбудитель. Дефинитивные  хозяева – кошка и другие представители кошачьих, которые выделяют овальные, неспорулированные ооцисты, покрытые нежной оболочкой, величиной 11-14 мкм. Эндогенные стадии в слизистой оболочке кишечника шизонты и гамонты диагностического значения не имеют. У промежуточных хозяев (млекопитающие, в том числе кошачьи, птицы) эндозоиты токсоплазм могут находиться в клетках, и между клеток нервной и лимфатической систем, паренхиматозных органов, в жидкости брюшной полости. Эндозоиты имеют вид полумесяца или дольки апельсина, один конец заострён, другой притуплен. Окрашенное по Романовскому ядро токсоплазм красновато-фиолетового, а цитоплазма – голубовато-серого цвета. Кроме того, токсоплазм можно обнаружить в виде цист и псевдоцист. Цисты – в мазках из мозга или внутренних органов (от 50-70 до 100-200 мкм). Псевдоцисты – скопление паразитов в вакуолях цитоплазмы лимфоидных клеток хозяев, они не имеют собственной оболочки.

Методы диагностики:  — эпизоотологические данные: распространено повсеместно. Восприимчивы многие млекопитающие и птица в любом возрасте. Заражение может наступить при  поедании  инвазированного мяса и ооцист, а также через повреждённую кожу при контакте с заражённым материалом (абортплод, свежее мясо, сыворотки крови больных) и внутриутробно;

— симптомы болезни: при остром течении: лихорадка, нарушение аппетита, рвота, понос, кашель, истечение из носа, конъюнктивит, мышечная дрожь, поражение нервной системы (нарушение координации движения, высокая возбудимость, агрессивность или резкое угнетение, парез, паралич). При подостром и     хроническом течении указанные признаки слабо выражены, или отсутствуют. Наблюдается патология беременности и родов (аборты, рождение мёртвых, недоразвитых, уродливых плодов).

— микроскопические исследования. В мазках из жидкости спинно-мозгового канала, желудочков головного мозга, брюшной и плевральной полостей, или отпечатках внутренних органов, окрашенных по Романовскому, находят возбудителей. Но это бывает редко. Более эффективный метод – серологический: РСК, РДСК с токсоплазменным антигеном. Реакции специфичны;

— патологоанатомические изменения во внутренних органах не характерны. В головном и спинном мозге находят отёки, кровоизлияния , некротические очажки. Лимфатические узлы   увеличены, геморрагичны. Гиперемия и отёк слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, обильный выпот в грудной и брюшной полостях. При абортах в плаценте обнаруживают некротические очажки и скопления токсоплазм.

Саркоцисты животных  — это гетероксенные возбудители (двух-хозяинные). Дефинитивные  хозяева – собаки, кошки, многие дикие плотоядные, а также человек; промежуточные хозяева – сельскохозяйственные, промысловые и дикие  животные.

У крупного рогатого скота паразитируют 3 вида: Sarcocista bovicanis,   Sarcocista bovifelis, Sarcocista bovihominis; у овец – 2 вида: Sarcocista ovicanis, Sarcocista ovifelis; у свиней – 2 вида: Sarcocista suicanis, Sarcocista suihominis. У саркоцист выражена строгая специфичность к видам хозяев. У дефинитивных  хозяев с фекалиями выделяются зрелые (спорулированные) ооцисты, чаще спороцисты. У промежуточных хозяев – эндогенные стадии саркоцист (мишеровы мешочки) находят в мышечной и реже в соединительной и нервной тканях. Цисты в мышцах имеют размеры от микроскопической величины (микроцисты), до 20 мм (макроцисты). Форма разная: овальная, нитевидная, веретенообразная. Внутри находятся мерозоиты банановидной формы.

Методы диагностики:  — эпизоотологические данные: широко распространено. Саркоцисты в кишечнике дефинитивных  хозяев обладают очень высокой репродуктивностью, а спороцисты и ооцисты во внешней среде сохраняются месяцами. Обитание кошек и собак на ферме способствует распространению возбудителя и болезни.

Сезонности не наблюдается. Кошки и собаки заражаются при поедании мяса инвазированного саркоцистами (мишеровы мешочки). Сельскохозяйственные животные  заражаются при проглатывании спорулированных ооцист с кормом или водой в любое время года;

— симптомы болезни: у собак и кошек – отказ от корма, понос, мышечная дрожь. У сельскохозяйственных животных: повышается температура тела (40,5оС), уменьшается поедаемость корма, понос, угнетение, снижение удоев. При хроническом течении животные худеют, анемия слизистых оболочек, отёки в подчелюстном пространстве, одышка, слабость мышц, парезы и параличи конечностей. Беременные абортируют;

— микроскопические исследования: исследование фекалий от дефинитивных  хозяев   методом Дарлинга или Фюллеборна обнаруживают спорулированные ооцисты и спороцисты. У промежуточных хозяев: серологический метод. Посмертно: осматривают туши овец и находят на пищеводе макроцисты (от рисового зерна до фасолины). У свиней – в мышцах диафрагмы, межрёберных и брюшной стенки. Микроцисты – в пробах из мышц сердца, пищевода, диафрагмы – компрессорным методом. Можно кусочки мышц окрасить по Романовскому или метиленовой синью. Метод люминесцентной микроскопии – саркоцисты светятся оранжевым цветом.

Дифференцировать необходимо от трихинелл (свёрнутая личинка); цистицерки – видна одна головка  с 4-мя  присосками, а у свиней – корона крючьев;

— патологоанатомические изменения: при слабом поражении изменения в туше мало заметны, при сильном обнаруживаем:   истощение, анемичность, гидремичность мышц, серозно-студенистые инфильтраты в подкожной клетчатке, кровоизлияния в желудочно-кишечном тракте и паренхиматозных органах