Лабораторная диагностика трематодозов. Диагностика: фасциолёза, дикроцелиоза, описторхоза, парамфистоматоза, простогонимоза птиц, эхиностомоза уток и гусей

laboratornaya-diagnostika-trematodozov-diagnostika-fasciolyoza-dikrocelioza-opistorxoza-paramfistomatoza-prostogonimoza-ptic-exinostomoza-utok-i-gusej_001Освещая данную тему, лабораторный специалист обязан знать морфологические особенности возбудителя, биологию развития его, некоторые эпизоотологические данные, симптомы болезни (при жизни), патолого-анатомические изменения (после смерти) и, конечно же, методы гельминтокопрологических и других  исследований.

Начнём с  диагностики таких трематод, который вызывают фасциолёзы. Итак,

Фасциолёзы – это заболевания домашних и диких животных, а также человека, вызывающие Fasciola hepatica  и  Fasciola gigantica (семейства Fasciolidae). Локализуются половозрелые фасциолы в жёлчных протоках печени, желчном пузыре. Это плоские черви, листовидной формы, длиной 20-30 мм, шириной 8-12 мм. На передней части фасциол расположены ротовая и брюшная присоски, позади брюшной – матка (в виде розетки), наполненная яйцами. За ней располагается яичник (в виде формы оленьих рогов). По бокам тела располагаются желточники. Среднюю и заднюю части тела занимают два древовидных разветвлённых семенника. Кишечные стволы разветвлены по бокам тела.

Fasciola gigantica отличается от Fasciola hepatica  размерами тела – 40-75 мм и 5-12 мм. Кроме того, у Fasciola hepatica  передний конец тела в виде «плечиков».

Фасциолы – это биогельминты. Промежуточными хозяевами являются пресноводные моллюски Lymnea truncatula (для Fasciola hepatica) – малый прудовик и  Lymnea auricularia (для  Fasciola gigantica) – ушковидный прудовик.

К диагностике любого гельминтоза, в том числе и фасциолёза необходимо подходить комплексно. Во-первых учитывают эпизоотологические особенности. Здесь необходимо знать от чего зависит распространение заболевания, места обитания промежуточных хозяев, то есть их биотопы и развитие в них, а далее во внешней среде инвазионной личинки (адолескариев).

Первичное заражение животных возможно ранней весной от перезимовавших моллюсков. Источником заражения молодняка текущего года рождения являются животные, вышедшие на пастбище без предварительной дегельминтизации. Массовое заражение животных регистрируется во второй половине июля, когда появляются новые популяции адолескариев. Следовательно, у молодняка текущего года рождения яйца фасциол в фекалиях можно обнаружить во второй половине октября и далее. В организме дефинитивного хозяина половозрелыми фасциолы становятся спустя 3-4 месяца. Продолжительность жизни фасциол – более 4-5 лет.

Не менее важным диагностическим тестом являются симптомы  болезни, которые зависят от интенсивности инвазии, вида фасциол, физиологического состояния и возраста дефинитивного (окончательного) хозяина и многих других факторов. Острое течение инвазии наблюдается через 2-2,5 месяца с момента заражения. В области печени увеличена площадь притупления, повышена чувствительность. Резко развивается анемия, уменьшается количество эритроцитов (до 3-4 миллионов). Снижается гемоглобин. Слизистые оболочки бледные, угнетение, залёживание животного, резкое увеличение печени, её болезненность, атония, нередко аборты.

При хроническом течении – систематические расстройства  желудочно-кишечного тракта (поносы, запоры), слизистые оболочки бледные, с желтизной; холодные отёки на веках, в межчелюстном пространстве, груди, нижней части живота. Снижается удой, удлиняется сервис-период.

Окончательно прижизненный диагноз на фасциолёз устанавливают гельминтокопрологическими, исследованиями  а именно гельминтоовоскопическими исследованиями. Для этого применяют метод последовательного промывания. Подробно о данной методике мы     говорили на 1-й лекции. Яйца фасциол овальной формы, желто-золотистого цвета, на данном полюсе имеется крышечка, на другом – бугорок. Желточные клетки заполняют всю полость яйца. Данные прижизненной диагностики можно дополнить полным гельминтологическим вскрытием печени (посмертно). При остром течении – печень увеличена, гиперемирована, мелкие кровоизлияния, перитонит. В брюшной полости транссудат и молодые фасциолы (под лупой). При хроническом течении развивается холангит, гепатит, ведущий к циррозу. В желчных протоках находят большое количество фасциол. Стенки желчных ходов обызвествляются.

Диагностика дикроцелиоза. Дикроцелиоз– заболевание крупного и мелкого  рогатого скота, диких жвачных, однокопытных, хищников, а также грызунов, вызываемое трематодами Dicrocoelia lanceatum из семейства Dicrocoeliidae. Эти трематоды ланцетовидной формы длиной 5-15 мм, шириной 1,5-2,5 мм. Ротовая и брюшная присоски. Между ними половые отверстия. Позади брюшной присоски располагаются наискось два  округлых или лопастных семенника, непарный яичник позади семенников. Задняя часть паразита заполнена петлями матки (с яйцами). Кишечные стволы прямые. Сбоку от них в средней части – желточники.

Дикроцелии – биогельминты. Промежуточными хозяевами являются сухопутные моллюски из рода Helicella и др., дополнительные хозяева – муравьи из род  Formica и др. Животные – дефинитивные хозяева заражаются при проглатывании инвазионной личинки – метацеркария. Трематоды достигают половой зрелости в желчных ходах печени (у овец) к 55-77 дню. Живут они в печени свыше 4-х лет.

Итак, мы ознакомились с возбудителем дикроцелиоза. Каковы же методы диагностики этого заболевания? Во-первых, обратим внимание на эпизоотологические данные. Заболевание распространено повсеместно. Заражение животных происходит весной, во второй половине лета и осенью, поедая с травой оцепеневших муравьёв с инвазионной личинкой – метацеркарием. С возрастом ИИ увеличивается  и достигает 20 тысяч экземпляров. Больные животные являются источником распространения инвазии. В организме моллюсков личинки дикроцелиев сохраняются 1,5-2года, а в муравьях – от 1,5 до 6-7 месяцев.

Не менее важным диагностическим тестом являются симптомы  болезни. При слабой ИИ они не заметны, при высокой – животные угнетены, худеют. В области подгрудка и в подчелюстном пространстве могут быть отёки. Расстройство функции пищеварения (поносы). Иногда у взрослых животных (овец) при плохих условиях кормления и содержания, наступает смерть.

Окончательный диагноз ставят гельминто — копрологическими исследованиями. Фекалии  исследуют методом последовательных смывов. Яйца дикроцелиев тёмно-бурого цвета, 0,038-0,045 мм длины, асимметричные, с толстой оболочкой, на одном из полюсов имеется крышечка, а внутри яйца – мирацидий (в виде Лейкартова глазка).

В случае летального исхода проводят ПГВ или НПГВ. В желчном пузыре и желчных протоках печени обнаруживаем трематод. На поверхности печени выделяются крупные тяжи, желчный пузырь увеличен в 2-3 раза. В отличие от фасциолёза не происходит обызвествления желчных ходов. Гепатит (интерстициальный), атрофия печени.

Диагностика описторхоза плотоядных. Описторхоз – это заболевание собак, лисиц, песцов и других плотоядных, в том числе свиней и человека, вызываемое трематодой Opistorhus felineus семейства Opitorchidae, паразитирующие в печени и поджелудочной железе дефинитивных хозяев.

Характеризуя морфологию возбудителя, следует отметить, что тело описторхиса спереди сужено, сзади тупо закруглено, длина 8-13 мм, ширина  1,2-3,5 мм. Имеются ротовая и брюшная присоски почти одинаковой величины. Задняя часть тела заполнена двумя лопастными семенниками, между которыми S-образно извивается экскреторный канал. Впереди семенников расположены яичник и семяприёмник. Среднюю часть паразита заполняют петли матки. Половые отверстия находятся впереди брюшной присоски. Половая бурса отсутствует, семявыводящий  проток сильно извитой. Как и все трематоды описторхи также являются биогельминтами. Дефинитивными хозяевами во внешнюю среду выделяются яйца с мирацидием. Попав в организм  промежуточного хозяина (пресноводные моллюски рода Bithinia),, за  2 месяца происходит их развитие и формируется церкарий. Дальнейшее их развитие происходит в дополнительном  хозяине, в теле рыб из семейства карповых, в которых формируется инвазионная  личинка — метацеркарий. Они же, попав в организм дефинитивного хозяина, достигают половой зрелости за 3-4 недели. И живут у плотоядных более 3-х лет, а у человека10-20 лет. Яйца описторхис трематодного типа, бледно-жёлтого цвета, с заметной крышечкой.

Методы диагностики: — учитывают эпизоотологические данные. Описторхоз – это природно-очаговое заболевание и распространено в районах рек: Обь, Енисей, Иртыш, Днепр, Волга. Основной источник распространения инвазии – человек и плотоядные животные. Скопление моллюсок и большое разнообразие видов пресноводных рыб служат причиной поддержания инвазии в природе. Дефинитивные хозяева заражаются при поедании рыбы инвазированной метацеркариями описторхисов.

Симптомы болезни: у плотоядных вначале отмечают плохой аппетит, угнетённое состояние, расстройство желудочно-кишечного тракта и истощение. Далее желтушность слизистых оболочек, болезненность в области печени.

Гельминтокопрологические исследования : гельминтоовоскопические методы: метод последовательных смывов, можно также использовать и метод Щербовича с применением гипосульфита натрия (1750 г на 1литр кипящей воды и  метод Калантаряна (1 кг азотнокислого натрия в 1 литре кипящей воды. Микроскопируем – обнаруживаем яйца описторхисов, с которыми мы уже ознакомились.

Можно использовать и иммунологические реакции. Посмертно диагноз устанавливают при обнаружении в желчных протоках печени описторхисов. При высокой ИИ печень увеличена и воспалительные процессы в желчных протоках, нередко цирроз печени. Большое диагностическое значение имеет исследование дополнительных хозяев – рыб, их поверхностных слоёв мышц спины и хвоста, под лупой (увеличение в 20-30 раз и обнаруживаем метацеркарии овальной или округлой формы с толстой оболочкой, величиной 0,23-0,37 х 0,18-0,28 мм).

Простогонимоз кур, индеек, уток, гусей и дикой птицы. Возбудитель трематоды из семейства Prosthogonimidae,  Prosthogonimus ovatus и  Prosthogonimus cuneatus. Локализуются у взрослой птицы в яйцеводе, а у молодых – в фабрициевой сумке. Их форма грушевидная, размер 3-6 мм длины и 1-2 мм ширины. Брюшная присоска в 2 раза больше ротовой. Семенники продолговато-овальные, находятся в задней половинке тела. Яичник расположен дорсально от брюшной присоски. Матка сильно извита. Половая бурса открывается у ротовой присоски. Prosthogonimus cuneatus отличается от Prosthogonimus ovatus расположением яичника, который лежит не дорсально, а позади брюшной присоски,  а матка впереди брюшной присоски не извивается.

Простогонимусы – биогельминты и развитие происходит с участием промежуточных хозяев, моллюсков рода Bithynia, а также дополнительных – стрекоз. Церкарии в моллюске формируются за 45 дней, а метацеркарии в стрекозе – за 70  дней. В организме дефинитивного хозяина за 7-16 дней достигают половой зрелости.

Методы диагностики:

эпизоотологические данные: заражаются птицы любого возраста, заболевание широко распространено. Это природно-очаговая инвазия. Источник инвазии – домашняя и дикая птица, а также инвазированные метацеркариями стрекозы;

симптомы: утончённая скорлупа у яиц, мягкая и легко разрывается (1-я стадия), снижение аппетита, недомогание, шаткая походка, ограниченность в движении, яйца без скорлупы, «литьё яиц» — 2-я стадия; 3-я стадия характеризуется ухудшением состояния, отказ от  корма, усиленная жажда, зловонный понос;

гельминтокопрологические исследования, гельминтоовоскопия методом последовательных смывов или методом Калантаряна. Яйца длиной 0,022 мм, желтовато-бурого цвета, прозрачные; на одном полюсе – крышечка, на другом – бугорок;

патологоанатомические изменения: главным образом у взрослой птицы, при высокой ИИ. Поражаются яичники и яйцевод, особенно белковый отдел его, деформированные яйца, фибринозный и фибринозно-гнойный перитонит. Обнаруживаем паразитов при помощи лупы.

Эхиностоматидозы уток и гусей, вызываются паразитированием в их кишечнике около 20 видов трематод из семейства Echinostomatidae. E.Revolutum —  длина 12 мм, ширина 2 мм. Брюшная присоска значительно крупнее ротовой. Семенники расположены по оси тела, один позади другого, а впереди них находится округлой формы яичник.

Эхиностоматиды – это биогельминты. Промежуточными хозяевами являются пресноводные моллюски рода Lymnaea и др., дополнительные хозяева – те же моллюски, а также рыбы, лягушки, тритоны и водные насекомые. Развитие личинок происходит за 50-80 дней. Половой зрелости в организме уток и гусей достигает за 8-16 дней и живут они около 2-х месяцев.

Методы диагностики:

— эпизоотологические данные: заражение происходит в любом возрасте, весь выпасной период. Высокая инвазия у молодняка до 2-х месяцев. Источник инвазии – домашняя и дикая водоплавающая  птица, водоёмы, где обитают промежуточные и дополнительные хозяева трематод;

— симптомы6 общие признаки, как угнетение, слабость, понос, кахексия, снижение яйценоскости;

гельминтоовоскопические исследования методом последовательных смывов и обнаружение яиц эхиностом, овальной формы, с крышечкой на одном из полюсов, светло-жёлтого до коричневого цвета;

патологоанатомические изменения: при вскрытии птиц обнаруживают большое количество трематод. Слизистая оболочка кишечника набухшая, содержимое с примесью крови и слизи.

 

Диагностика парамфистоматоза  крупного рогатого скота, овец, коз, оленей и других жвачных. Вызывает заболевание  трематоды из семейства Paramphistomatidae и Gastrothylacidae, родов Liorchis scotiae,  Paramphistomum ichikawai,  P.cervi и др. Тело возбудителя конической или грушевидной формы, Длина паразитов 5-20 мм, ротовой присоски нет, 2 крупных семенника лежат  один позади другого, яичник находится позади семенников. Половое отверстие открывается в передней части тела, вблизи бифуркации кишечника.

Цикл развития происходит с участием пресноводных моллюсков, где личинки развиваются за 2,5 месяца. Дефинитивные хозяева заражаются при поедании адолескариев. Молодые формы трематод мигрируют в подслизистую12-перстной кишки и через 1,5-2 месяца возвращаются в преджелудки, где и достигают половой зрелости (марита) за 3,5-4,5 мес. и живут 2-3 года.

Методы диагностики: — эпизоотологические данные: источник инвазии- взрослые животные. Личинки могут перезимовывать в теле моллюсков, животные заражаются ранней весной; второй подъём заболевания в августе и сентябре. ЭИ – 90-100 %, ИИ- 6-10 тысяч экземпляров, у овец – 600-8000 трематод. Яйца парамфистом в фекалиях молодняка крупного рогатого скота и овец текущего года обнаруживают чаще в июле и августе;

симптомы: течение острое и хроническое. Остро протекающая кишечная форма проявляется у молодняка, в возрасте 1-2-х лет при росте ИИ, вялость, снижение аппетита, диарея с примесью крови, шерсть тусклая, слизистые оболочки бледные, повышается температура тела, а в дальнейшем снижается, отёки в подчелюстном пространстве и подгрудке, гибель на 7-8 день. Хроническое течение обусловлено скоплением большого количества трематод в преджелудках, нарушается функция желудочно-кишечного тракта , бледность слизистых оболочек, в области мечевидного хряща ощущается болезненность, прогрессивное исхудание животных, кал зловонного запаха;

гельминтокопрологические исследования  в период острого течения: исследование  фекалий методом последовательных смывов для обнаружения молодых (юных) форм парамфистомат. Гельминтоовоскопия – метод последовательных смывов, обнаружение яиц бледно-серого цвета, овальной формы, с крышечкой на одном полюсе, длина их – до 0,120-0,172 мм. Желточные клетки не полностью заполняют полость яйца;

патологоанатомические изменения: острое течение – выражена отёчность  и катарально-геморрагическое воспаление 12-перстной кишки и пилорической части сычуга, воспаление желчного пузыря с увеличением в объёме желчных протоков.

Молодых трематод обнаруживают при осмотре слизистой оболочки кишечника и желудка. Хроническое течение: взрослых трематод находят при осмотре полости преджелудков. В неостывших трупах трематоды фиксируются задним концом к ворсинкам рубца, книжки или ячейки сетки. Возбудители светло-розового цвета, напоминают разваренное зерно риса. В местах прикрепления – атрофия ворсинок